Los increíbles beneficios de extracto de arroz negro cianidina 3 glucósido

¿Qué es la cianidin3-glucoside?

Cian3-glucoside (Cy-3-glc,C3G) Es el antocianosido más común, ampliamente distribuido y abundante entre el compuesto de antocianidina [1][2]. El 3-glucósido de maíz se encuentra comúnmente en las hojas, frutos y raíces de las plantas de color oscuro, como las plantas de color naranja, rojo y púrpura, especialmente en el arroz negro [3]. Un gran número de estudios en el país y el extranjero han demostrado que la 3-glucósido de maíz tiene una variedad de actividades biológicas, tales como la prevención de enfermedades cardiovasculares, la mejora de la fatiga visual, y la reducción de pacientes diabéticos ' Inflamación, y así sucesivamente.

¿Cuál es la construcción de cian3-glucoside?

Antocianosido pertenece a los flavonoides, por lo que tiene la estructura típica de los flavonoides, es decir, C3-C6-C3 como el esqueleto básico, y es un derivado de 2-fenilcromeno [4]. El padre de antocianósido es antocianina, porque antocianina es inestable, por lo que en la naturaleza, es principalmente antocianina como un ligando combinado con otros azúcares para formar diferentes glucósidos, es decir antocianósidos. La mayoría de las antocianinas tienen sustitude hidroxilo en los sitios de 3,5,7 carbonos. Diferentes antocianósidos se forman debido a las diferencias en los sustituyentes del anillo b. Actualmente, el 6 Los antocianósidos más comunes en la naturaleza son: cianinina, pelargoninidina, delphinidina, peonidina, peunidina y malvidina. Debido a los diferentes tipos, posiciones y cantidades de azúcares de Unión en los antocianósidos, los antocianósidos también son diferentes. Los principales azúcares de Unión son los monosacáridos como la glucosa, la ramnosa, la galactosa y la xilosa, ylos disacáridos como la ramnoglucosa y el disacárido de acacia [5]. La estructura de la 3-glucósido se muestra en la Fig. 1-1, que está formado por la combinación de maíz y una glucosa.

Fig.1-1    Estructura de cian3-glucósido

Contenido de cianin-3-glucósido en el extracto de arroz negro

De acuerdo con la literatura, el contenido deCyanidin-3-GlucosideEn el arroz negro es extremadamente rico [6], y Jing Wang et al[7] concluyeron experimentalmente que el contenido de cian3-glucósido del arroz negro es de hasta (1.017 − 0.028) mg/g.

En este experimento, se utilizó extracto de arroz negro como material experimental, y su ciandin-3-glucósido fue puripor una columna cromatográfica con tres tipos de rellen, a saber, resina macroporab-8, poliamida y gel de dextran, a su vez, para obtener ciandin-3-glucósido, y la pureza pudo alcanzar el 95% después del cálculo.

1 métodos experimentales

1.1 Método técnico

Preparación de cian3-glucósido a partir de extractos de arroz negro

Fig 2-1 Condiciones de detección del producto de cian3-glucoside

1.2 análisis cualitativo y cuantitativo de la cian3-glucósido en el extracto de arroz negro

Preparación de muestras

Después de la liofilización de la solución de prueba de antociande de arroz negro, pesar 10 mg de polvo liofilizado, disolen en 6% de ácido fórmico, y llevar a un volumen constante en 10 mL, a continuación, utilizar 0,2 μ el filtro de aguja dem se utilizó para la filtración y la determinación se llevó a cabo utilizando un ultra High performance Liquid cromatotriple Four stage Rod tandem mass spectrometer.

Procedimiento de eludel gradiente de la tabla 2-1 Para UPLC

1.2.2 métodos cualitativos y cuantitativos

(1) métodos cualitativos

El análisis cualitativo de las muestras separadas y purificadas se llevó a cabo mediante una columna de cromatolíquida de ultra alta performance (UPLC) bajo el barride de los modos de monitoreo de reacción múltiple (MRM), combinado con análisis de ultravioleta (UV) y espectrode masas (MS) comprobando el tiempo de retención de cian3-glucósido en el control de cian3-glucósido y en los extractos de arroz negro aislado y puri.

(2) Método cuantitativo

10 mg de extracto de arroz negro, A1, A2, A3, A4, B1, B2, B3, B4, B5 y C1 fueron pescon precisión y condensados en un matorril volumétrico de 100 ml con 6% de ácido fórmico, y medidos con el control de cianidin-3-glucósido bajo las mismas condiciones cromatográficas, y luego se obtuvo la concentración de la solución preparada a partir de la ecuación de curva estándar, y la pureza de cada muestra a ensayar se obtuvo a partir del cálculo de la ecuación (2. 1).

1.3 Aislamiento y purificación de cian3-glucósido de extractos de arroz negro

1.3.1desengrase de extractos de arroz negro

1.3.2 preparación del extracto de antocianina a partir de extractos de arroz negro

1.3.3 aislamiento y purificación de cian3-glucósido de extractos de arroz negro

(1) separación y purificación por adsorción en resina macroporosa AB-8

(2) cromatode columna de poliamida

(3) separación y purificación por cromatode columna en Gel

2. Resultados y discusión

2.1 análisis cualitativo y cuantitativo de la cian3-glucósido en el extracto de arroz negro

2.2 optimización de parámetros de espectrode masas para la sustancia de referencia de cian3-glucósido

Como se muestra en la figura 2-2.

2.3 análisis cualitativo de la cian3-glucósido en el extracto de arroz negro

Basado en los parámetros establecidos de espectrode masas, el tiempo de retención de cian3-glucósido en extracto de arroz negro fue determinado por cromatolíquida de ultra-alta performance. Como se muestra en la figura 2-3 (A), el tiempo de retención de la solución estándar de cianidin3-glucoside es de 3,46 minutos. Como se muestra en la figura 2-3 (B), el tiempo de retención del pico cromatográfico principal en la solución de extracción de antocianina de arroz negro es de 3,46 minutos, por lo que la principal antocianina en arroz negro es cianidin-3-glucósido.

2.4 determinación cuantitativa de cian3-glucósido en extracto de arroz negro

Dibuuna curva estándar con la concentración como eje horizontal y el área del pico como eje vertical, como se muestra en la figura 2-4. La ecuación de regresión Y=79.027X+85.746 (Y es el área de pico, X es la concentración), el coeficiente de correlación R2=0.9991, Y la relación lineal de cianidin-3-glucósido es buena dentro del rango de 19.2 a 134.40 ng/ml.

Fig.2-3   The cromatograms of Black Rice And (en inglés) Cianidin-3-glucoside ( Norma C3G)

Cuadro 2 a 2   El área pico de la solución estándar Cy-3-glc

Fig.2-4   La curva estándar De la C3G

2.5 aislamiento y purificación de cian3-glucósido de extracto de arroz negro

2.5.1 método de adsorde resina macroporab-8

Fig.2-5  The cromatograms of Anthocyanins of Black Rice Extract (en inglés)

Fig.2-6   Los cromatogramas de C3G separados de arroz negro por adsorde resina macroporab-8

Nota: figura A: cromatograma de A1; Figura B: cromatograma de A2; Figura C: cromatograma de A3; Figura D: cromatograma de A4

2.5.2 cromatode columna de poliamida

Usando etanol anhidro y etanol al 80% para realizar la eludel gradiente hacia adelante en columnas de cromatode poliamida que contienen A1 y A4 en secuencia, como se muestra en la figura 2-7. De acuerdo con el cromatograma de los resultados de detección de UPLC-MS/MS, el Cy-3-g1c en arroz negro fue separado y puriusando este método, y el tiempo pico fue consistente con los resultados de AB-8. Después del cálculo, la pureza de B1, B2, B3 y B4 fue 91,6%, 92,3%, 93% y 92%, respectivamente. En comparación con A1 y A4, la pureza de cian3-glucósido se mejoró significativamente después de la purificación con poliamida, lo que indica que el método de purificación de poliamida jugó un papel importante en la separación y purificación de cian3-glucósido en el extracto de arroz negro.

Nota: A: B1 cromatograma; B: cromatograma B2; C: cromatograma B3; D: cromatograma de B4; E: cromatograma B5

2.5.3 Gel Column cromato.

Mediante el método de purificación de poliamida se ha obtenido ciandin3-glucósido de alta pureza, como se muestra en la figura 2-8. Basándose en el cromatograma C1 de los resultados de detección y la comparación con el cromatograma B5, se puede observar que después de la separación y purificación de cian3-glucósido en extracto de arroz negro utilizando este método, no se encontró ningún pico de impureza. Después de la detección, la pureza de C1 se calculó para ser del 95%, con una ligera mejora en la pureza, se puede ver que la cromatode columna de gel puede promover la separación y purificación de cianidin-3-glucósido.

Después del cálculo, la tasa de preparación de cian3-glucósido con una pureza del 95% es de 0,098%, que está cerca del laboratorio#39;s detección previa de un contenido de cian3-glucósido de 0,1% en arroz negro. Al mismo tiempo, hay una pequeña diferencia en comparación con los datos obtenidos por Wang Jing et al. [8] con un contenido de cian3-glucósido de (1.017 ± 0.028) mg/g, lo que indica que el método utilizado en este experimento tiene una alta tasa de preparación y una alta pureza del compuesto obtenido, lo cual es digno de promoción generalizada.

Fig.2-8 los cromatogramas de C3G separados de arroz negro por columna de gel de glucosa cromatocromatocromatografía

3. Resumen resumen

Este estudio utilizó UPLC-MS/MS para el análisis cualitativo y cuantitativo de la cian3-glucósido en el extracto de arroz negro. Comparando el tiempo de retención con la sustancia de referencia de cianidin-3-glucósido bajo las mismas condiciones de espectrode masas, fase líquida y UV, se puede concluir que el monómero de antocianina de extracto de arroz negro aislado y purificado es cianidin-3-glucósido. Los resultados son consistentes con los reportados en la literatura.

Los increíbles beneficios de extracto de arroz negro cianidina 3 glucósido

Se informa que el extracto de arroz negro cianidin-3-glucósido tiene muchas actividades fisiológicas [10-13], tales como la eliminación de radicales libres [9], anti-oxid[10], anti-inflamatorio, anti-tumoral [8], la prevención de la diabetes y la mejora de su nefropatía [11][12][13], la protección del hígado, la protección de la vista, y la protección del cerebro de accidente cerebrovascular isquémico [14][15][16]. Como se ha informado en la investigación, la cianidin3-glucoside tiene un efecto protector en la lesión cerebral post-isqua través del estrés antioxidante, la promoción de la síntesis endotelial de óxido nítrico sintasa, antiinflam, inhibide la apoptosis neuronal, y la promoción de la expresión de la quimioquina plasmática.

Hao et al. [6] han mostrado que la cian3-glucósido puede reducir significativamente las concentraciones elevadas de creatinina sérica y nitrógeno ure, así como las concentraciones de xantina oxid, malondialdehído y óxido nítrico en los riñones causadas por la lesión renal grave indupor KBrO3 en ratones. Su efecto protector en los riñones es la capacidad de eliminación de radicales libres de las antocianinas. Zhang Chuyang et al. [17] usaron la línea celular de cáncer de hígado humano HepG-2 como modelo para estudiar el efecto protector de la cianidin-3-o-glucósido (C3G) sobre el estrés oxidativo indupor H2O2 en las células. Los resultados mostraron que la ciandin-3 glucoside no tenía toxicidad significativa para las células HepG-2 en el rango de 0-0,5 mmol/L; A alta (400 μ Mol/L), media (200 μ Mol/L), baja (50 μ tratamiento con cianidin-3-glucósido a tres concentraciones de Mol/L aumentó significativamente la capacidad antioxidante total, la actividad de superóxido dismutasa, y redujo el contenido de glutatión de las células, mientras que redujo el contenido de malondialdehído intrac. Song Nan et al. [18] investigaron el efecto de la cian3-glucósido en el metabolismo de la glucosa y los lípidos en la enfermedad de Alzheimer#39;s ratones modelo de enfermedad (da). Los resultados indican que la cianidin-3 glucoside regula la resistencia a la insulina y la respuesta inflamatoria a través de la vía JNK/AKT, mejorando eficazmente los trastornos del metabolismo de la glucosa cerebral en ratones modelo de AD, pero no regula significativamente el metabolismo lipídico, y puede inhibir la deposición de placas relacionadas con la edad en el hipocampo del cerebro.

Yu Renqiang et al. [19] se propuso investigar los efectos de la cian3-glucósido en el peso corporal, los lípidos sanguíneos y la resistencia a la insulina en ratas obesas. Las ratas obesas fueron inducidas por una dieta alta en grasas y se divial azar en un grupo control y un grupo experimental. El grupo experimental fue alimentado por gavaged con 100 mg/(kg · d) de cianidin-3-glucósido, mientras que el grupo control fue alimentado por gavaged con una cantidad igual de solución salina fisiológica. Después de una alimentación continua durante 5 semanas, los resultados mostraron que el peso corporal, la masa de grasa visceral, la tasa media de utilización de la energía de los alimentos, el colesterol total, los triglicéri, el colesterol de las lipoproteínas de baja densidad, el índice de arteriosclerosis, la glucosa sanguínea en ayunas, la insulina sérica y el índice de resistencia a la insulina del grupo experimental fueron significativamente menores que los del grupo control (r < 0,05). Mientras que el colesterol de lipode alta densidad y la adiponectina sérica fueron significativamente más altos que los del grupo control (r < 0.05), por lo tanto, se puede concluir que la cian3-glucosido puede disminuir el peso corporal, aumentar la masa grasa visceral, mejorar los trastornos del metabolismo de la glucosa y los lípidos relacionados con la obesidad y la resistencia a la insulina en ratas obesas, y especular que su mecanismo puede estar relacionado con el aumento de la secreción de adiponectina sérica. Lin Huai et al. [18] exploraron el efecto del 3-glucósido de la flor de maíz en el daño hepático y renal inducido por el plomo mediante experimentos con ratas. Los resultados mostraron que la 3-glucósido de la flor de maíz tenía un efecto protector significativo en el daño hepático y renal inducido por plomo, pero su mecanismo de acción aún necesita más investigación.

Extracto de arroz negro cianidin-3-glucósido experimento:

La investigación sobre la cian3-glucoside en el país y en el extranjero muestra que tiene una variedad de actividades biológicas tales como la prevención de enfermedades cardiovasculares, mejorar la fatiga visual y reducir la inflamación en pacientes con diabetes, pero el contenido de cian3-glucoside detectado en la sangre y tejidos relacionados es extremadamente bajo. La razón de esta paradoja puede ser que la cian3-glucósido sufre reacciones metabólicas en el tracto gastrointestinal, la generación de metabolirelacionados que entran en la sangre y tejidos relacionados, resultando en efectos relacionados actividad biológica.

Este estudio tiene como objetivo validar esta hipótesis, utilizando la ciandin-3-glucoside como material experimental, utilizando métodos experimentales in vivo e in vitro, y UPLC-MS/MS como método de detección, para analizar cualitativa y cuantitlos metabolide ciandin-3-glucoside en el tracto gastrointestinal de rata, y explorar sus cambios metabólicos en el tracto gastrointestinal de rata. Al mismo tiempo, mediante el análisis de los metabolide cianidin-3-glucósido en la sangre de rata, se aclarla la absorción de sus metabolien el cuerpo, proporcionando una base para dilucidar si los metabolide cianidin-3-glucósido tienen actividades biológicas relevantes y proporcionando una referencia para revelar el mecanismo de actividad de cianidin-3-glucósido. Los principales contenidos y resultados de la investigación del proyecto son los siguientes:

(1) El arroz negro fue utilizado como material experimental para purician3-glucósido en resina macroporab-8, columna de gel de poliamida y dextran. El contenido de cian3-glucósido después de la purificación fue del 95%, y el rendimiento fue de 0,098%.

(2) Utilizando cian3-glucósido como material experimental y el método UPLC-MS/MS como método de detección, se estudiaron los productos metabólicos y los principales sitios metabólicos de cian3-glucósido en el intestino de ratas utilizando el método de solución de incubin vitro. Los resultados mostraron que había 11 metabolide cianidin-3-glucósido en el intestino de la rata, incluyendo ácido 2,4,6-trihidroxibenzoico, ácido protocatecúico, ácido p-hidroxibenzoico, ácido vanílico, ácido hipúrico, ácido cafeico aldehído fenófenó, ácido p-cumári, cianidin-3-glucósido, cianidina y ácido ferúlico. Los principales sitios metabólicos son el yeyuno, el íleon y el colon.

(3) Utilizando cianidin3-glucósido como material experimental y el método UPLC-MS/MS como método de detección, el estómago, duoden, yeyuno, íleo y colon de ratas se recogieron en diferentes períodos de tiempo después de la administración por sonda de cianidin-3-glucósido. Se detectaron los metabolide cianidin-3-glucósido, y se detectaron un total de 11 tipos, incluyendo ácido 2,4,6-trihidroxibenzoico, ácido protocatequiico, ácido p-hidroxibenzoico, ácido vanílico, ácido hipúrico ácido cafeico, phloroglucinol aldehído, ácido p-cumári, cianidin-3-glucósido, cianidina y ácido ferúlico, los tipos de productos son consistentes con los resultados del método in vitro, y cianidin-3-glucósido está principalmente presente en su forma original en el jugo gástrico, Mientras que la cian3-glucósido está principalmente presente en forma de aglicona (cianidina) en el duoden, yeyuno, íleon, y colon.

(4) Utilizando cianidin-3-glucósido como material experimental y el método UPLC-MS/MS como método de detección, se detectaron un total de 10 metabolide cianidin-3-glucósido en sangre de rata, incluyendo ácido protocatequiico, ácido p-hidroxibenzoico, ácido vanílico, ácido hipúrico, ácido cafeico, es un aldehído fenó Otros metaboliintestintestde cian3-glucósido puede ser absoren en el torrente sanguíneo a través del intestino. A través de la comparación, se encontró que los principales sitios de absorción son el yeyuno, el íleon y el colon.

Los resultados de la investigación confirman que la cian3-glucósido sufre reacciones metabólicas en el tracto gastrointestinal, resultando en una serie de metabolirelacionados que pueden ser absorbidos en el torrente sanguíneo a través del intestino.

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